Cuando un empresario corrupto y el grotesco Pingüino tratan de tomar el control de Ciudad Gótica, sólo Batman puede detenerlos, mientras que Gatúbela tiene sus propios planes.

Batman debe luchar contra el ex fiscal de distrito Harvey Dent, que ahora es Dos Caras y Edward Nygma, El Acertijo. Batman contará ahora con un nuevo interés amoroso y un joven acróbata de circo que queda huérfano y se convierte en su compañero: Robin.

Los experimentos del doctor Victor Fries, mediante los cuales busca conservar criogénicamente la vida de su esposa, originan un error fatal que lo convierte en el señor Frío, un villano que necesita mantener su cuerpo a temperaturas glaciales y que intentará congelar a todos los habitantes de Ciudad Gótica. Además, en el transcurso de un experimento, la tímida botánica Pamela Isley se transforma en la terrible Hiedra Venenosa, que tratará de asesinar a todos los seres humanos para que las plantas recuperen su hegemonía sobre la Tierra. Batman y su compañero Robin deberán enfrentarse a ellos para hacer fracasar sus siniestros planes.

La oscura y peligrosa Ciudad Gótica se halla protegida por su corrupto cuerpo de policía. A pesar de los esfuerzos del fiscal del distrito Harvey Dent y el comisionado de policía Jim Gordon, la ciudad es cada vez más insegura hasta que aparece Batman, el Señor de la Noche. La reconocida periodista Vicky Vale intentará descubrir el secreto que se oculta tras el hombre murciélago.